小林,年龄19岁,结婚1年,性生活1-5次/周,未采取任何避孕措施,配偶未孕。年父亲带着儿子从外地来北京就诊。在外地精液检查无精子,检出白细胞8-10个/高倍。精液中白细胞有可能是生精细胞误认为白细胞,也许是白细胞。白细胞临床以附属性腺感染,需要抗生素治疗。如果将生殖细胞错误报告白细胞,最终是导致误诊,不能给患者解决疾病问题,耽搁治疗。
精液中的有形成分是睾丸生精小管与附属性腺的代谢产物,是直接反映睾丸生殖功能的具体表现。对精液中的有形成分进行有效的分类与检出是实验室的责任,更是临床医生医生诊疗的迫切需要,而我们应该结束临床工作中的简单报告“圆细胞”时代。目前,临床工作中广泛缺乏开展的单纯计算机辅助精液常规检查(CASA)已经不满足临床诊断和治疗的需要,精液脱落细胞检测是对生殖细胞凋亡、胀亡以及形态评估睾丸生殖功能状态,反映了睾丸生理病理的变化过程,为临床提供睾丸损伤的病理信息。
单纯计算机辅助精液常规检测:精液常规检测是判断男性生育能力的最基本检查,是对精液、精子质量以及男性受孕能力的一个初步评判。目前临床精液检验中,医院的精液常规分析仅包含精子密度、精子运动和精液酸碱度等简单结果,精液分析正常,并不能代表生育能力一定就正常。单纯的精液常规分析只是反映精子的数量、活力、活率、白细胞数量等,却无法反映精子形态、精子功能,精子DNA,故不能准确预测精子受精能力。
精液脱落细胞学检出率与分类:生精细胞检出的临床意义主要体现在两个方面,一,精液中生精细胞的检出能有效地区别于精液中其他细胞(如白细胞),以免误诊;二,精液中生精细胞的检查结合精浆附属性腺指标测定可鉴别梗阻性无精症和非梗阻性无精症,并可反映睾丸的生殖功能以精子形态为依据,进行病因定位;生精细胞凋亡、胀亡、形态以及中性粒细胞、吞噬细胞和淋巴细胞的检出给临床提高诊断依据和疗效的疗效。
1精液中生精细胞检出率
精液生精细胞的检出曹老(年)对生育组个生精细胞进行分类:精原细胞为:1.9%,初级精母细胞脱落为9.3%,次级精母细胞脱落为7.5%,精子细胞为81.1%;根据生精细胞的有无、多少、形态特征,将生精情况分为细胞存在性异常型、细胞比例异常型和细胞形态异常型,作为衡量睾丸生精功能的评估标准。
2生精细胞及其形态分型
2.1生精细胞存在异常型:
生育与不生育男性的男性精液中均存在精子和(或)生精细胞,若精液中找不到精子及生精细胞,则称为生精细胞存在异常型(无生精细胞),临床表现为无精症。结合精浆生化,确定是否梗阻性无精症。
2.2生精细胞比例异常型:
在生生育男性的精液中,约25%的人检出生精细胞。精液中,精原细胞,初级精母细胞,次级精母细胞和精子细胞的比例分别为6%、7.6%、7.8%和3%。生精细胞比例异常是指其中1种或以上生精细胞的比例超出生育的男性比例范围。
2.3生精细胞形态异常型:
某种因素影响睾丸生精功能时细胞形态出现异常。如放射线、辐射、高温影响生精细胞形态变化,睾丸中对热敏感的细胞有初级精母细胞和精子细胞。在精子细胞中可见到核染色质溶解,核膜增厚,中央形成空泡,核皱锁等,而发育成畸形精子。精母细胞可以出现核固缩,染色质和胞质溶解,以及巨精母细胞形成。
3支持细胞及骨架检出:
支持细胞生长在生精小管的内表面,是生精上皮中唯一与生精细胞接触的细胞,各级生精细胞都按成熟程度自生精小管基底部向管腔排列,靠近管腔的血睾屏障,外管腔侧的生精细胞,必须通过支持细胞获取营养。支持细胞在睾丸生精细胞诱发性凋亡中的作用,除去发生自发性凋亡外,还能被多种内源性和外源性因素诱发产生凋亡,如促性腺激素及睾酮减少、化学药物和毒素、高温、辐射、环境污染以及睾丸的急性缺血-再灌注损伤等,它们通过多种途径影响生精细胞凋亡,其中支持细胞结构及功能的改变扮演了重要角色。支持细胞受有害因素刺激后,易使支持细胞骨架发生断裂,睾丸受到影响,损伤后的支持细胞必然会随着精液排出体外,在精液中可以看到损伤和脱落的支持细胞及骨架成分。精液中检出支持细胞及支持细胞骨架,说明睾丸微环境受累,损伤已威胁到支持细胞功能,其功能的优劣将直接决定生精细胞的分化程度及精子的生成。支持细胞的检出对睾丸生精功能的深入研究提供了新手段和新依据。
4精液脱落细胞学可代替睾丸活检
睾丸活检是无精子症患者诊断和治疗的重要手段,多年来已被临床所接受。单次睾丸活检可能难以全面、完整反映睾丸的生精功能,同时多点或多次的手术取材反而会加重对睾丸功能的损伤。精液脱落细胞学检测能够依据睾丸的代谢物,能够更全面、准确了睾丸功能,提高了对睾丸生精功能评估的准确性。近年来通过检测精液脱落细胞学,血清FSH,T/LH比值,抑制素B及精浆生化果糖和a-糖苷酶,逐渐取代了具有侵H比值、抑制素B及精浆果糖和中性α葡糖取代了具有侵袭性的睾丸活检这一传统方法。
真实案例讲解李翠英博士小林,年龄19岁,结婚1年,性生活1-5次/周,未采取任何避孕措施,配偶未孕,曾在外地精液检查无精子。年其父亲带他来北京就诊,检出白细胞8-10个/高倍。当时我们给患者做精液脱落细胞学检查,精液中检出大量脱落的生精细胞,外地精液中检出的白细胞就是生精细胞。目前,临床工作中广泛缺乏开展的单纯计算机辅助精液常规检查(CASA)已经不满足临床诊断和治疗的需要,而精液中简单报告“圆细胞”,对临床医生和患者带来误导。生精细胞检出率与分类评估睾丸生殖功能状态,反映了睾丸生理病理的变化过程,为临床提供睾丸损伤的病理信息。我们当时对生精细胞凋亡、胀亡、形态、多寡、细胞阻滞来评估睾丸病理损伤状态,衡量睾丸生殖功能,为疗效评估提供依据。
●既往史:无腮腺炎史,无隐睾、疝气、精索静脉曲张等手术史,无结核病史。
●个人史:无特殊嗜好。
●家族史:否认遗传疾病史。
●体格检查:第二性征发育正常,包皮过长,双侧睾丸体积12ml,质度尚可,双侧附睾未见异常,无双侧精索静脉曲张,双侧输精管存在,前列腺体积正常,中央沟存在。
●辅助检查:1、精液常规:未见精子
2、性激素水平:FSH:4.21(参考值:1.5-12.4mIU/ml),LH:(参考值:1.7-8.6mIU/ml)、T:3.45(参考值:2.49-8.36ng/ml)。
3、B超:睾丸体积12ml,睾丸附睾精索未见异常。
4、遗传学检查:46XY染色体,Y染色体未缺失。
5、精液脱落细胞学分析:可见生精细胞大量脱落(高峰期),生精细胞发育停滞在初级精母细胞阶段,未见成熟精子,可见支持细胞脱落骨架脱落,说明睾丸支持细胞功能减退。
●诊断:无精症(生精阻滞)
●治疗方案:治疗原则是靶向治疗。治疗的视点在于“睾丸界膜区”,以睾丸界膜为靶区,间质细胞和支持细胞为靶细胞,线粒体为靶点的三靶学说。
无论是那种不育症——睾丸生精功能障碍是本病。而治疗原则是睾丸生精障碍的治疗,界膜区(包括基膜、间质)损伤是导致一系细胞损伤、变化、引起少、弱、畸、无精子的临床表现。睾丸生精过程而言,生精小管的界膜,间质细胞(LC)和支持细胞(SC)是调控生殖细胞功能状态的中心环节,而LC和SC的损伤与否,以及细胞内线粒体功能异常。常常是造成不育的关键因素,因此,诸多因素是界膜为靶区,以LC和SC为靶细胞,以线粒体为靶点,造成睾丸生殖功能障碍。
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